揭曉:ELISA試劑盒技術員的實驗秘技

近日有位客戶致電給我司業務員，抱怨ELISA試劑盒實驗太難，掌握不好，一不小心就毀了實驗。我司業務員表示，一定要有全面的準備，不能放棄，多加學習多加練習，可以隨時聯系我們的售后技術員指導。其實ELISA實驗并沒有那么難，今天我們一起來看上海恒遠揭曉:ELISA試劑盒技術員的實驗秘技

第一、吸光度值偏高是怎會回事？ 可能引起的原因有孵育的溫度過高、反應的時間過長。相對應的解決辦法是調整孵育環境的溫度，如無法調整室內的溫度，請將顯色時間適當的縮短、控制反應時間。

第二、檢測的結果沒有吸光度值或吸光度值很低怎么辦？ 首先我們來看下原因，可能引起的原因有試劑盒已過有效期、使用的試劑盒內容物不是同一個批次的、沒加入酶標記物、試劑盒的內容物沒有充分的回溫、孵育的溫度太低等，相對應的解決辦法是更換成在有效期以內的試劑盒、使用同～個批次的試劑盒的內容物、按照試劑盒說明書中的步驟進行操作、將試劑盒的內容物充分的回溫后再進行操作、在實驗操作的整個過程中請仔細觀察恒溫箱的溫度。

第三、陰性樣本的吸光度值低于陽性吸光度值的解決方案 可能引起的原因是出現跳孔的現象或酶標板孔中的試劑未充分的混合。解決的辦法是注意操作的方法，注意洗滌時的方法、加完試劑后可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30s，混勻液體。

第四、標準曲線的問題 線性不好，或平行性不好(雙孔對照孔的OD值差別很大)，或出現跳孔的現象可能引起的原因有酶標板孔間相互污染、洗板后未能盡快進行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發、酶標板孔問加入的試劑量不同，相對應的解決辦法是加樣時請小心勿將液體濺人另一孔中，人工洗板時也請小心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入，切記勿將頭接觸到板孔內，吸取不同試劑瓶中的液體時就要更換一次頭、確認孵育環境不透光，蓋板膜將酶標板密封好、使用已校正過的微量加樣器，如將第一次加入液體時頭上留有一滴的液體滴下，那么將以后頭上留有的液體也滴下，以保證加入液體體積的一致性。

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